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酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀測(cè)量波長(zhǎng)的設(shè)定以什么為標(biāo)準(zhǔn)

酶標(biāo)儀測(cè)量波長(zhǎng)的設(shè)定以什么為標(biāo)準(zhǔn)

酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀。是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的專用儀器又稱微孔板檢測(cè)器??珊?jiǎn)單地分為半自動(dòng)和全自動(dòng)兩大類,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個(gè)比色計(jì),即用比色法來進(jìn)行分析。 測(cè)定一般要求測(cè)試液的最終體積在250μL以下,用一般光電比色計(jì)無法完成測(cè)試,因此對(duì)酶標(biāo)儀中的光電比色計(jì)有特殊要求。

實(shí)驗(yàn)中波長(zhǎng)的選擇主要依賴于你要測(cè)的樣品。樣品在不同的波長(zhǎng)下,對(duì)光的吸收值也不同,但都有一個(gè)吸收峰,一般選擇吸收峰時(shí)的波長(zhǎng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。比如同樣是MTT法做細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn),就有使用490nm和570nm兩種波長(zhǎng)選擇,如果使用了DMSO作為試劑,在溶解后呈紫(紅)色,在490nm有最大吸收值;而對(duì)于SDS和酸化異丙醇,則選用570nm(655nm作為參考波長(zhǎng))。
酶標(biāo)儀波長(zhǎng)設(shè)定還要看你用的是什么酶標(biāo)儀,如果是光柵式單色器(可以1nm步進(jìn)調(diào)節(jié)),就可以直接設(shè)定吸收峰的波長(zhǎng);如果是濾光片式單色器,因?yàn)槭転V光片波長(zhǎng)限制,有時(shí)你就需要選接近使用波長(zhǎng)的濾光片,比如655nm,你就可能選用650nm的濾光片。


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